最近,瑞典卡羅林斯卡學(xué)院和愛沙尼亞醫(yī)療技術(shù)能力中心的科學(xué)家合作,開發(fā)出了一種新的基因表達(dá)分析方法,讓通過(guò)全血RNA-seq進(jìn)行生物標(biāo)志物的發(fā)現(xiàn)和分析,將會(huì)變得更為簡(jiǎn)單。
血液攜帶的細(xì)胞,可提供多種有用的生物標(biāo)志物。血液作為一種液體活檢,在臨床研究中有著廣泛的應(yīng)用,因?yàn)槠淙拥暮?jiǎn)便性和快速動(dòng)態(tài)性:大多數(shù)的細(xì)胞是攜帶氧的紅細(xì)胞,在所有血液RNA當(dāng)中致使球蛋白R(shí)NA分子50%?80%的富集。
技術(shù)上的偏差
球蛋白如此高的普遍性,因此,血液相關(guān)基因表達(dá)生物標(biāo)志物的研究,就變得復(fù)雜化,從而造成了技術(shù)偏差,并留下了無(wú)法探測(cè)到的生物相關(guān)分子。根據(jù)研究人員介紹,這項(xiàng)研究首次介紹了一種詳細(xì)方法??GlobinLockTM??能夠克服紅細(xì)胞引起的血樣分析的局限性,紅細(xì)胞使得從血液中識(shí)別或跟蹤下游的任何生物標(biāo)志物,都變得復(fù)雜化。已公布的和正在申請(qǐng)專利的試驗(yàn),最大限度地減少了對(duì)試劑和樣品材料的需求,從而使得它成為一種有效和強(qiáng)大的工具。
本文第一作者、KaarelKrjut?kov博士說(shuō):“GlobinLock的球蛋白下降率,對(duì)于任何應(yīng)用程序來(lái)說(shuō)是足夠的。它將球蛋白的普遍率從以前的63%減少到了5%,這使得它成為生物科技公司的一種有效工具,被添加到試劑盒中!
DNA鏈
這種新的方法包括一對(duì)短的合成DNA鏈,通過(guò)高度特異性結(jié)合,可沉默大多數(shù)的球蛋白R(shí)NA分子。根據(jù)研究人員解釋,這兩條鏈被引入到純化的RNA樣品中,并且,在RNA變性后是立即有效的,整個(gè)互補(bǔ)的DNA合成過(guò)程,只有十分鐘的潛伏期。
鎖定的DNA分子特異性地結(jié)合在球蛋白的RNApoly-A位點(diǎn),這還需要進(jìn)一步分析。因此,在下游操作之前,球蛋白R(shí)NA是被“鎖定的”,在血液RNA生物標(biāo)志物的應(yīng)用中并不會(huì)引起技術(shù)的偏差。
JuhaKere教授說(shuō):“我們發(fā)現(xiàn),球蛋白鎖定是完全有效的,不僅適用于人類的樣本,也廣泛適用于動(dòng)物模型,如小鼠、大鼠、牛、狗甚至斑馬魚!
應(yīng)用測(cè)序技術(shù)尋找生物標(biāo)志物,已經(jīng)有了一系列的研究進(jìn)展,例如,2019年10月,蘇州大學(xué)第一附屬醫(yī)院譚友文副教授帶領(lǐng)的團(tuán)隊(duì)對(duì)血清microRNA(miRNA)的表達(dá)譜進(jìn)行研究,確定其是否可作為HCC的一種新的診斷標(biāo)志物,研究成果發(fā)表在PLoSONE上。
2019年,日本理化學(xué)研究所(RIKEN)生命科學(xué)技術(shù)中心(CLST)和澳大利亞HarryPerkins醫(yī)學(xué)研究所的研究人員通過(guò)RNA測(cè)序,發(fā)現(xiàn)了很多個(gè)基因,它們?cè)谠S多不同類型的癌癥中是上調(diào)的,從而為開發(fā)生物標(biāo)志物檢測(cè)、早期發(fā)現(xiàn)癌癥進(jìn)而及時(shí)治療,提供了機(jī)會(huì)。
今年2月,浙江大學(xué)細(xì)胞生物學(xué)研究所李繼承教授領(lǐng)銜的課題組采用iTRAQ標(biāo)記結(jié)合2DLC-MS/MS,以及Solexa測(cè)序?qū)DR-TB患者,藥物敏感結(jié)核。―S-TB)患者,和健康對(duì)照組血清中的蛋白質(zhì)組和miRNA組進(jìn)行了比較分析,鑒定出MDR-TB診斷的潛在生物標(biāo)志物。
本文來(lái)自:逍遙右腦記憶 http://portlandfoamroofing.com/gaozhong/1114065.html
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