高中生物知識點:單克隆抗體

編輯: 逍遙路 關(guān)鍵詞: 高中生物 來源: 高中學(xué)習(xí)網(wǎng)


單克隆抗體:

1、抗體:一個B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體。從血清中分離出的抗體產(chǎn)量低、純度低、特異性差。
2、單克隆抗體的制備
(1)制備產(chǎn)生特異性抗體的B淋巴細(xì)胞:向免疫小鼠體內(nèi)注射特定的抗原,然后從小鼠脾內(nèi)獲得相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞
(2)獲得雜交瘤細(xì)胞
①將鼠的骨髓瘤細(xì)胞與脾細(xì)胞中形成的B淋巴細(xì)胞融合;
②用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞,該雜種細(xì)胞既能夠增殖又能產(chǎn)生抗體。
(3)克隆化培養(yǎng)和抗體檢測
(4)將雜交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖
(5)提取單克隆抗體:從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠的腹水中提取
3、單克隆抗體的應(yīng)用
(1)作為診斷試劑,具有準(zhǔn)確、高效、簡易、快速的優(yōu)點。
(2)用于治療疾病和運載藥物。



血清抗體與單克隆抗體的比較:















名稱產(chǎn)生特點
血清抗體由B淋巴一般從血清中分離,產(chǎn)量低、純度低、特異性差
單克隆抗體由雜交瘤細(xì)胞分泌特異性強,靈敏度高,能大量制備


知識點撥:

1、融合的結(jié)果是有很多不符合要求的;如有2個B淋巴細(xì)胞融合的細(xì)胞等,所以要進行篩選。
2、篩選出能夠分泌所需抗體的雜種細(xì)胞。
3、雜交瘤細(xì)胞的特點:既能大量繁殖,又能產(chǎn)生專一的抗體。
4、單克隆抗體的優(yōu)點:特異性強,靈敏度高,并能大量制備。
5、單克隆抗體的作用:作為診斷試劑:準(zhǔn)確識別各種抗原物質(zhì)的細(xì)微差異,并跟一定抗原發(fā)生特異性結(jié)合,具有準(zhǔn)確、高效、簡易、快速的優(yōu)點。用于治療疾病和運載藥物:主要用于治療癌癥治療,可制成“生物導(dǎo)彈”,也有少量用于治療其它疾病。

知識拓展:

制備單克隆抗體過程中的篩選:篩選是將未融合的B淋巴細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞以及BB融合、瘤瘤融合的細(xì)胞通過選擇培養(yǎng)基淘汰,篩選出B瘤融合的細(xì)胞。篩選是將產(chǎn)生特定抗體的B瘤細(xì)胞通過細(xì)胞培養(yǎng)用相應(yīng)抗原檢測的辦法篩選出來。因為從體內(nèi)取免疫過的B淋巴細(xì)胞時取出很多種,形成的雜交瘤細(xì)胞有很多種,所以需篩選出產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞。



相關(guān)高中生物知識點:植物體細(xì)胞雜交技術(shù)

植物體細(xì)胞雜交技術(shù):

1、植物體細(xì)胞雜交技術(shù):就是將不同種的植物體細(xì)胞原生質(zhì)體在一定條件下融合成雜種細(xì)胞,并把雜種細(xì)胞培育成完整植物體的技術(shù)。
2、過程:

(1)誘導(dǎo)融合的方法:物理法包括離心、振動、電刺激等。化學(xué)法一般是用聚乙二醇(PEG)作為誘導(dǎo)劑。
(2)細(xì)胞融合完成的標(biāo)志是新的細(xì)胞壁的生成。
(3)植物體細(xì)胞雜交的終點是培育成雜種植株,而不是形成雜種細(xì)胞就結(jié)束。
(4)雜種植株的特征:具備兩種植物的遺傳特征,原因是雜種植株中含有兩種植物的遺傳物質(zhì)。
3、意義:克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙。

知識點撥:

1、體細(xì)胞雜交即兩個細(xì)胞融合成一個細(xì)胞,不管染色體數(shù)、基因組數(shù)還是染色體組數(shù)都采用直接相加的方法。若一植物細(xì)胞含有2Ⅳ條染色體,2個染色體組,基因型為Aabb,另一植物細(xì)胞含有2M條染色體,2 個染色體組,其基因型為ccDd,則新植株應(yīng)為四倍體,其體細(xì)胞中染色體數(shù)為2N+2M,基因型為AabbccDd。 2、用該過程培育新品種的過程中,遺傳物質(zhì)的傳遞不遵循孟德爾的遺傳定律。只有有性生殖進行減數(shù)分裂過程中才符合遺傳定律,而體細(xì)胞雜交沒有此過程。
3、植物體細(xì)胞雜交克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙,大大擴展了可用于雜交的親本組合范圍。.



知識拓展:

1、植物體細(xì)胞雜交包括植物體細(xì)胞(原生質(zhì)體)融合和雜種細(xì)胞培育成一個新植株的過程。融合的細(xì)胞有多種類型,必須經(jīng)過篩選,然后才能培育出我們所需要的雜種植株。
2、植物體細(xì)胞雜交過程中無有性生殖細(xì)胞的結(jié)合,屬于無性生殖。
3、從雜種植株的染色體組成上看,染色體數(shù)目增加,屬于染色體數(shù)目的變異。


相關(guān)高中生物知識點:動物細(xì)胞的融合

動物細(xì)胞的融合:

1、動物細(xì)胞融合:兩個或多個動物細(xì)胞結(jié)合形成一個細(xì)胞的過程。融合后形成的具有原來兩個或多個細(xì)胞遺傳信息的單核細(xì)胞,稱為雜交細(xì)胞。
2、誘導(dǎo)方法:化學(xué)法(聚乙二醇),滅活的病毒,物理法(離心、振動、電激等)。
3、動物細(xì)胞融合的意義:克服了遠(yuǎn)緣雜交的不親和性,成為研究細(xì)胞遺傳、細(xì)胞免疫、腫瘤和生物新品種培育等的重要手段。


動物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交的比較:




























細(xì)胞工程


植物體細(xì)胞雜交


動物細(xì)胞融合


理論基礎(chǔ)


細(xì)胞的全能性、細(xì)胞膜的流動性


細(xì)胞增殖、細(xì)胞膜的流動性


融合前處理


酶解法去除細(xì)胞壁
(纖維素酶、果膠酶)

注射特定抗原,免疫處理正常小鼠

誘導(dǎo)手段


物理法:離心、振動、電激
化學(xué)法:聚乙二醇(PEG)

物理法:離心、振動、電激
化學(xué)法:聚乙二醇
生物法:滅活的病毒(滅活的仙臺病毒)

誘導(dǎo)過程

第一步:原生質(zhì)體的制備(酶解法)
第二步:原生質(zhì)體融合(物、化法)
第三步:雜種細(xì)胞的篩選和培養(yǎng)
第四步:雜種植株的誘導(dǎo)與鑒定

正常小鼠免疫處理動物細(xì)胞的融合
(物、化、生法)雜交瘤細(xì)胞的篩
選與培養(yǎng)專一抗體檢驗陽性細(xì)胞培
養(yǎng)單克隆抗體的提純


用途和意義


克服遠(yuǎn)緣雜交的不親和障礙,
大大擴展雜交的親本組合范圍
應(yīng)用:白菜——甘藍(lán)等雜種植株


(1)制備單克隆抗體
(2)診斷、治療、預(yù)防疾病,例如“生物導(dǎo)彈”治療癌癥



知識點撥:

動物細(xì)胞融合與植物原生質(zhì)體融合的原理基本相同,誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合的方法與植物原生質(zhì)體融合的方法類似,常用的誘導(dǎo)因素有聚乙二醇、滅活的病毒、電刺激等。

知識拓展:

1、在誘導(dǎo)劑的作用下進行細(xì)胞的誘導(dǎo)融合,形成的雜種細(xì)胞有三種:AA型、BB型、AB型。只有AB型才是我們所需要的雜種細(xì)胞,所以需要用選擇性培養(yǎng)基進行篩選。
2、相比較植物體細(xì)胞雜交,動物細(xì)胞融合特有的誘導(dǎo)方式是用滅活的病毒處理,其他物理化學(xué)誘導(dǎo)融合的方法與植物體細(xì)胞雜交過程中原生質(zhì)體融合方法相同。

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